福建林学院学报200727（切割潜蝇茧蜂2个地理种群的RAPD比较分析梁光红1黄居昌2，陈家骅212（1.福建农林大学林学院，福建福州3500022.福建农林大学益虫研究室，福建福州350002）用经筛选的8个10 bp随机引物，运用随机扩增多态DNA（iandcmamplifiedpolymorphicDNARAPD）技术比较其漳州种群和引进种群（美国夏威夷）的分子多态性。结果表明，2个地理种群A、B分离物之间相异系数均大于0.7地理种群内部分离物相异系数分别为0.3和0.12差异较小。不加权算术平均组对法（unweghtedpairgroupmothedwith arithmeticmeanUPGMA）聚类结果表明，4个吩离物在0.76的相异水平上可以聚为2体，而在0.12的相异水平上才能聚为4体。表明A、B地理种群之间相异性较高，差异较大。
切割潜蝇茧蜂是寄生橘小实蝇幼虫一蛹期的重要寄生蜂，在非洲南部、马来西亚、印度、菲律宾、泰国、美国夏威夷、中国福建等区域分布11-21.通常一种昆虫地域分布很广时，常有种内的变异，寄生蜂种内变异在害虫生物防治中的重要性长期以来一直受到关注。随机扩多态DNA（mndomamplfiedpoymorphicDNA，RAPD）技术是一项基于聚合酶链式反应（polymerasechainreactbnPCR）技术上的DNA分子水平上的大分子多态检测技术运用扩产物的多态性鉴定和分析相似物种和系统发育情况。Blacketal3首先应用RAPD技术鉴别比较4种蚜虫及蚜虫体内的2种寄生蜂。在我国，鲁亮等14总结了RAPD技术的特点及其在昆虫分类中的应用，但目前对于茧蜂种及种以下分类应用较少，仅朴美花等15、吕宝乾等161使用茧蜂干标本成功地提取了基因组DNA开创了国内用寄生蜂干标本提取基因组DNA的先例；刘春林等171研究了中国棉田和稻田茧蜂近缘种的RAPD分子标记技术为用茧蜂近缘种的分子多态性研究提供了借鉴。
由于切割潜蝇茧蜂在地域上的广泛分布及其在橘小实蝇的生物防治中的重要性，笔者在对采自福建漳州和引自美国夏威夷的切割潜蝇茧蜂2个地理种群进行RAPD比较研究，旨在揭示可能存在的种群间的变异性，以期为利用该蜂对橘小实蝇进行生物防治、探讨物种进化机制提供有用信息。有关切割潜蝇茧蜂不同地理种群间的分子多态性差异研究在我国尚属首次。
1材料与方法1.1供试材料供试的切割潜蝇茧蜂为2个地理种群分为雌、雄，共4个样品。其分别为：（1）A（早）和A（公），切割潜蝇茧蜂产于福建漳州，称漳州种群（中国新纪录，2004）（2）B（早）和B（公），引进的切割潜蝇茧蜂（引自美国夏威夷），称引进种群。即漳州早、漳州公、引种早、引种公共4个品种。即在基因水平上分析2个地理种群间的分子多态性差异，并依据同一地理种群间的雌雄个体来评价种群内部差异。
1.2DNA提取方法采用SDS方法（十二烷基磺酸钠）提取基因组DNA18-91（试剂盒：DP303/304）取10头寄生蜂用液氮淹没至粉末状，然后加入200卜。
当然本研究的供试材料还很有限，筛选出的标记仅是针对供试样品，对于其在不同的遗传背景下是否可稳定扩增出特征带还未知，对于属过渡类型试验材料的标记结果也不明确。因此，在可能的条件下，采集或培养2个地理种群的过渡材料，以提供更为丰富的供试研究材料，确保应用RAPD技术研究其亲缘关系的准确性，有待进一步研究。
供试的切割潜蝇茧蜂2个地理种群在混合饲养时存在交配现象，但是否交配成功并繁殖具有生殖力的后代还有待继续验证，这对进一步明确二者的亲缘关系和物种生态专化性的进化具有重要意义，与种族或生物型的形成、种化的关系则更大。同时，明确寄生蜂不同地理种群的种内的变异性，可指导在生物防治中选择应用适宜的品系，这对生物防治的成功是至关重要的。
